產(chǎn)品介紹
Fluo-3 AM是一種常用的檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光探針。 Fluo-3 AM是一種可以穿透細(xì)胞膜的熒光染料。Fluo-3 AM進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-3,從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)。Fluo-3游離配體幾乎是非熒光性的,其熒光不會(huì)隨鈣離子濃度升高而增強(qiáng)。Fluo-3可以和鈣離子結(jié)合,結(jié)合鈣離子后可以產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光,最大激發(fā)波長(zhǎng)為506 nm,最大發(fā)射波長(zhǎng)為526 nm。實(shí)際檢測(cè)時(shí)推薦使用的激發(fā)波長(zhǎng)為488 nm左右,發(fā)射波長(zhǎng)為525-530 nm。可以使用激光共聚焦顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。
本Fluo-3 AM(鈣離子熒光探針)可以用無(wú)水DMSO(anhydrous DMSO)配制5mM的儲(chǔ)存液。 用于細(xì)胞內(nèi)鈣離子檢測(cè)時(shí),F(xiàn)luo-3 AM的常用濃度為0.5-5 μM。通常用含有0.5-5μM的Fluo-3 AM的適當(dāng)溶液和細(xì)胞一起在20-37℃孵育15-60分鐘進(jìn)行熒光探針裝載,隨后適當(dāng)洗滌,洗滌后可以考慮適當(dāng)再孵育20-30分鐘以確保Fluo-3 AM在細(xì)胞內(nèi)完全轉(zhuǎn)變成Fluo-3。
注意事項(xiàng)
本Fluo-3 AM在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi),可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
熒光染料均存在淬滅問(wèn)題,請(qǐng)盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。