產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品簡介外觀:黃色粉末純度:≥95% (HPLC)產(chǎn)品參數(shù)Ex(nm):494Em(nm):520Solvent:DMSO產(chǎn)品描述FITC能和各種抗體蛋白結(jié)合,結(jié)合后的抗體不喪失與一定抗原結(jié)合的特異性,并在堿性溶液中具有強烈的黃綠色熒光。通過在熒光顯微鏡下觀察或流式細胞儀分析可對相應抗原進行定性、定位或定量的檢測。用于醫(yī)學,農(nóng)學和畜牧等方面,可對由地細菌病毒和寄生蟲等所致疾病進行快速診斷。FITC標記抗體流程(1)將待交聯(lián)的蛋白(濃度≥1mg/mL)對交聯(lián)反應液透析三次4℃,至pH=9.0。交聯(lián)反應液配制方法:7.56g NaHCO3,1.06g Na2CO3,7.36g NaCl,加水定容至1 L。(2)將FITC溶于DMSO中,濃度為1mg/mL。每次交聯(lián)使用的FITC均應新鮮配制,避光。(3)按P:F(蛋白質(zhì):FITC)=1mg:150μg?的比例將FITC緩慢加入于抗體溶液中,邊加邊輕輕晃動使其與抗體混合均勻,暗處4℃反應8h。(4)加入5mol/L的NH4Cl至終濃度50mmol/L,4℃終止反應2h。(5)將交聯(lián)物在PBS中透析四次以上,至透析液清亮。(6)交聯(lián)物的鑒定蛋白濃度(mg/mL) = [ A280– 0.31×A495?] / 1.4F/P比例: 3.1×A495?/ [A280?– 0.31×A495?],該值應介于2.5~6.5之間。(7)FITC交聯(lián)的蛋白應置于pH 7.4的磷酸鹽緩沖液中,加入0.1% NaN3、1% BSA,4℃避光保存。