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介紹:轉鐵蛋白是血漿中主要的鐵傳遞蛋白,為細胞分化和細胞代謝提供所需的鐵。研究發現
所有的細胞生長都離不開轉鐵蛋白。不但維持正常的細胞代謝依賴于以生物活性形態存在的
鐵,鐵還是一些酶的輔助因子,比如 RNA 聚合酶,DNA 合成酶。同時也是血紅蛋白的重要
組成部分。
轉鐵蛋白是血漿糖蛋白,從血漿中分離而來,牛轉鐵蛋白以兩種分子形態存在,分子量
分別為 74KD 和 78KD。每個轉鐵蛋白分子通過 C 端和 N 端結構位點可以結合兩分子鐵離子,
所以轉鐵蛋白以三種形態存在:脫鐵(不結合鐵離子),飽和鐵(結合兩分子鐵離子)和部
分飽和,在生理情況下,轉鐵蛋白分子僅有 1/3 被鐵飽和。
使用說明:
轉鐵蛋白對于絕大部分細胞系在無血清培養基中生長是必需的,研究表明飽和鐵形態的
轉鐵蛋白對于促進細胞生長是最有效的形態。對于雜交瘤,黏連細胞和懸浮細胞系,在細胞
培養過程中,應保持培養基中轉鐵蛋白濃度在 0.5-100μ g/ml。針對不同的細胞系,需要選
擇最合適的濃度。
轉鐵蛋白凍干粉需要保存在冷藏狀態下,使用之前再溶解。一般用 PBS 或者其它合適
的溶劑在室溫下將轉鐵蛋白凍干粉溶解成儲液,濃度在 0.5-2.0mg/ml,然后用無菌濾膜進行過
濾,濾液可在無菌條件下 2-8℃保存 30 天。