產品介紹

源葉EdU-488細胞增殖檢測試劑盒(Meilun EdU Cell Proliferation Kit with Alexa Fluor 488)，是一種利用核苷滲入法對細胞增殖情況進行快速、簡單、高靈敏檢測的試劑盒。其原理為：試劑盒中的EdU(5-ethynyl-2' -deoxyuridine)是一種胸苷(T)類似物，EdU可以在在細胞周期的S期中替代胸苷摻入到新合成的DNA中；另一方面，EdU上的乙炔基能與疊氮化物(如熒光探針Alexa Fluor 488 Azide)通過Cu+的催化發生共價反應，形成穩定的三唑環，該反應非常迅速，被稱作點擊反應(Click reaction) (圖1)。通過點擊反應，新合成的DNA會被綠色熒光標記，然后通過檢測熒光信號實現細胞增殖的檢測。細胞增殖檢測是評估細胞活性、遺傳毒性及抗腫瘤藥物效果等的基礎實驗手段。細胞增殖檢測的方法按照原理通常可以分為五類：膜損傷檢測、代謝活性檢測、ATP水平測定、DNA合成檢測和細胞熒光標記檢測法。目前公認的最精確的檢測細胞增殖的方法是直接檢測細胞中DNA的合成，即核苷滲入法。以前常用的核苷滲入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸類似物)法，但BrdU法的缺點是需要變性DNA后才能與抗體結合，導致了DNA雙鏈結構的破壞，影響了其他染料的結合染色，導致染色彌散，準確性降低等問題。EdU法作為新型的核苷滲入法具有以下優點：

安全-----不使用[3H]thymidine，無放射性污染。

簡單-----基于小分子化學反應的檢測方法，簡單高效，僅需三步：EdU孵育；細胞固定；熒光檢測。無需DNA變性和孵育抗體。

快速-----無需過夜，省卻抗原抗體反應。整個檢測過程只需 2.5 小時，大大縮短實驗周期。

準確-----標記率高且無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免變性帶來的樣品損傷，確保細胞核邊緣清晰完。

靈敏-----無需抗體，檢測染料僅為BrdU抗體的1/500，更容易擴散，即使單個增殖細胞也能準確檢測。

兼容-----對樣品幾乎無損傷，允許與多種抗體或熒光蛋白同時標記，能夠同時檢測細胞其他性狀特征。