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抗原檢測(cè)and核酸檢測(cè)你了解多少呢?
源葉生物 / 2022-04-18

 2022年,新冠歷經(jīng)3年,本以為已經(jīng)平息的國(guó)內(nèi)新冠疫情又隨著奧密克戎及其變異株的強(qiáng)傳播性和隱匿性而復(fù)燃。同時(shí),全球也正經(jīng)歷著新冠疫情第四波流行高峰。今年,國(guó)家衛(wèi)健委最新發(fā)布了抗原檢測(cè)方案,新的新冠檢測(cè)方案引起了大家的高度關(guān)注。
目前,上海在全市范圍內(nèi),主要通過(guò)抗原檢測(cè)和核酸檢測(cè)相結(jié)合的方式進(jìn)行篩查工作。

 

 

那么,抗原檢測(cè)與傳統(tǒng)的核酸檢測(cè)有什么區(qū)別呢?都是什么原理呢?

讓我們來(lái)細(xì)看一下:

抗原檢測(cè)和核酸檢測(cè)的相同點(diǎn)是什么?

抗原檢測(cè)和核酸檢測(cè)都屬于體外診斷,是指對(duì)人體樣本(血液、體液、組織等)在體外進(jìn)行檢測(cè)而獲取臨床診斷信息,進(jìn)而判斷疾病或機(jī)體功能的產(chǎn)品和服務(wù)。體外診斷主要分為免疫診斷、分子診斷、生化診斷、血液和體液學(xué)診斷等方法。不同診斷方法的檢測(cè)原理和技術(shù)手段不同,應(yīng)用領(lǐng)域也存在較大差異。

抗原檢測(cè)和核酸檢測(cè)的區(qū)別是什么?

抗原檢測(cè)和核酸檢測(cè)就是兩種不同的技術(shù)手段,檢測(cè)病毒不同的物質(zhì)。抗原檢測(cè)通過(guò)檢測(cè)病毒的特異性蛋白,相當(dāng)于是病毒穿的外衣;而核酸檢測(cè)則是檢測(cè)病毒的核酸基因片段,是病毒內(nèi)的基因。

抗原檢測(cè)的特點(diǎn):快速、簡(jiǎn)便。目前已經(jīng)推出了多款抗原檢測(cè)的試劑盒,不需要專(zhuān)業(yè)人員采樣,不需要專(zhuān)門(mén)的設(shè)備,在家就能自行檢測(cè),一般幾分鐘即可出結(jié)果。但是抗原檢測(cè)必須要求樣本已經(jīng)含有大量抗原,出現(xiàn)癥狀5天以?xún)?nèi)的人群中進(jìn)行檢測(cè)才更準(zhǔn)確有效。

核酸檢測(cè)特點(diǎn):精準(zhǔn)。核酸檢測(cè)則需要專(zhuān)門(mén)的PCR儀,進(jìn)行病毒基因特異片段的擴(kuò)增過(guò)程,可以將很少量的病毒基因片段擴(kuò)增至檢測(cè)限以上,因此哪怕只有少量的病毒核酸也能被發(fā)現(xiàn),有助于早期病例的發(fā)現(xiàn)。

 

因此,核酸檢測(cè)結(jié)果才是目前診斷新冠病毒感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”。

抗原檢測(cè)是什么原理?

新冠抗原檢測(cè)采用膠體金的方法,新型冠狀病毒的N蛋白可作為免疫原,在病毒感染人體后,刺激漿細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體。依據(jù)雙抗夾心ELISA原理,樣本滴加在樣本墊上,通過(guò)液相層析依次通過(guò)結(jié)合墊,NC膜上的檢測(cè)線(T線)和質(zhì)控線(C線)。結(jié)合墊內(nèi)含有標(biāo)記的抗原特異性抗體,可以與樣本中的抗原(病毒蛋白)發(fā)生結(jié)合,當(dāng)液流到達(dá)檢測(cè)線(T線)時(shí),固定在這條線上的第二種抗原特異性抗體再次與抗原結(jié)合,將會(huì)呈現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果。質(zhì)控線(C線)包被IgY抗體,可以結(jié)合樣本墊中抗體,用于判斷層析過(guò)程是否順利。

 

核酸檢測(cè)是什么原理?

目前的核酸檢測(cè)是通過(guò)探針?lè)ㄔ恚脡A基配對(duì)的原則,使用熒光探針進(jìn)行實(shí)時(shí)跟蹤測(cè)定。將帶有標(biāo)記的已知DNA或者RNA序列作為核酸探針,與待測(cè)樣品中互補(bǔ)的序列配對(duì)退火形成雙鏈,通過(guò)這一核酸雜交的過(guò)程,檢測(cè)核酸樣品中特定基因序列。每一種病原體都具有獨(dú)特的核酸片段或者片段的獨(dú)特組合,比如新冠病毒的ORF1ab基因、N基因等。

新冠病毒的檢測(cè)中,使用的就是寡核苷酸引物和探針。目前國(guó)家藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的幾十個(gè)新冠病毒核酸檢測(cè)試劑盒中,采用熒光PCR法的占大多數(shù);

熒光PCR法,目前通常為實(shí)時(shí)熒光定量PCR,這一技術(shù)是普通聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR技術(shù)的拓展。在原始的PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR放大擴(kuò)增特定的DNA片段的進(jìn)程,最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析。

PCR擴(kuò)增時(shí)加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收,無(wú)法檢測(cè)或只有微弱熒光;PCR擴(kuò)增時(shí),Taq酶的5'3'外切酶活性將探針酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,熒光信號(hào)大大增強(qiáng),從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到信號(hào),每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。擴(kuò)增出來(lái)的基因越多,累計(jì)的熒光信號(hào)就越強(qiáng),以此來(lái)確定樣本中是否有病毒核酸,也就是確認(rèn)受檢者是否被感染。

 

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